中文摘要：

春石斛是世界著名的观赏兰花，其花芽的分化需要一定时间的低温诱导。研究者在文心兰、秋石斛中克隆了MADS-box家族的一系列基因，同时还发现homeobox家族中knox类基因DOH1在MADS-box基因上游对其表达进行调控，另一些研究发现konx类基因受CTK类物质的调节。利用CTK类物质，我们已经能够有效的诱导春石斛的花芽分化，利用这项技术为平台，通过RT-PCR和DD-RTPCR，结合Northern 杂交筛选和5'－RACE，在CTK诱导花芽分化的过程中，克隆受CTK调控的春石斛knox及MADS-box基因；并希望在今后的研究中证明其与花芽分化过程的相关性。由于春石斛成花的分子机理目前还未见研究报道，该研究可能会有一些新的发现，会为植物成花机理的研究积累资料。同时，利用该研究成果，也可以进一步完善春石斛等需低温催花兰花的催花技术，该技术是目前我国春石斛栽培中亟待解决的关键技术。

结论摘要：

春石斛是高档著名花卉，花芽的形成需要春化过程。其开花机理的研究对生产中花期调控技术的完善和改进，对春化机制的进一步认识，都有重要意义。以春石斛育种中最常用的亲本金钗石斛为材料，利用RT-PCR及SSH技术，分别克隆了2个MADS box基因（DNMADS1、DNMADS2）和1个Homeobox基因（DNKNOX1），建立了通过CTK诱导其开花过程的缩减文库。在获得了3个基因的序列全长的同时，研究了其在植物体不同器官的表达情况及在低温、CTK类物质处理对其表达的影响。DNKNOX1基因在类原球茎、根、叶、花瓣、合蕊柱、中萼片和唇瓣中都有表达，表明其可能与花的发育过程相关；低温引起表达的变化，但TDZ处理后，DNKNOX1的表达末发现明显差异。DNMADS1在金钗石斛的类原球茎和根、茎、叶、侧萼与合蕊柱等器官表达，DNMADS2只在类原球茎与合蕊柱中表达。6-BA促进DNMADS1和DNMADS2的表达，TDZ则抑制二者尤其是DNMADS2在类原球茎中的表达，低温抑制类原球茎中和促进叶片中DNMADS2的表达。共获得差异表达的克隆324个，经测序和生物信息学初步分析，选出有兴趣克隆15个