中文摘要：

本课题建立了以菌蜕（BG）为载体的双重靶向DNA疫苗的研究策略，提高DNA疫苗在抗原提呈细胞（APCs）中的表达水平及抗原提呈效率。首先温控诱导大肠杆菌裂解并制备BG；同时将编码HCV NS3的DNA片段连接到Ii表达载体上，构建了内源靶向质粒pDSRed-mIi-NS3-Th1；建立BG装载质粒的方法，装载率接近100%；使用BG装载的质粒的转染APCs细胞系，质粒DNA及NS3基因片段均得获高效表达；用BG装载的质粒免疫小鼠，发现双重靶向组的抗体滴度及淋巴细胞分泌的细胞因子水平高于单靶向组，而单靶向组高于非靶向组；荷瘤实验证明，BG装载的pDSRed-mIi-NS3-Th1组几乎完全抑制含NS3抗原表位的SP20肿瘤在Balb/c小鼠体内生长，而其它组的抑制效果较低。研究证实BG是良好的DNA疫苗载体，可靶向性地将DNA疫苗导入APCs并获得高效表达，而Ii的内源性靶向作用可提高抗原提呈水平，双重靶向研究策略可显著提高DNA疫苗的体液免疫水平和细胞免疫水平，增强对含NS3表位的肿瘤细胞的杀伤效果，研究结果为HCV防治提供有效策略，有可能在疾病防治中发挥重要作用。