舌苔原理及其客观化研究是中医现代化基础研究中的一个重大关键性课题。伴随人类基因组计划的完成,人类对生命本质与疾病的研究进人了后基因组时代。功能基因组和蛋白质组学是现代生命科学的最重要的前沿领域。本研究拟在多年研究成果的基础上,运用功能基因组、蛋白质组学技术,基于分子整体水平开展舌苔原理及唾液与舌苔的微观辨证学研究,并进行唾液和血清蛋白质组学比较研究,探讨舌苔、唾液、血清蛋白质组及中医证候之间的
目的:从舌苔蛋白质组探讨舌苔原理及其微观规律。方法:对以固相pH梯度等电聚焦为第一向、垂直SDS-PAGE为第二向的双向电泳技术中的关键因素与环节,如样品处理、上样量、电泳参数、凝胶浓度和SDS凝胶电泳染色方法等进行了研究和实验条件的优化。并对其四组舌苔组织的蛋白质组进行分离,银染显色,凝胶扫描入计算机,ImageMaster 2D Platinum软件分析比较电泳图谱。选择 36个差异点切下,胶内胰酶消化后,进行质谱(MALDL-TOF-MS)ImageMaster 2D Platinum软件分析获得的二维凝胶图像。结果: 建立并优化了蛋白组学分析中的双向电泳技术,建立了蛋白质组研究中的图像分析体系,获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱。并用其四组舌苔组织的蛋白质组进行分离分析,结果发现凝胶中可检测的蛋白质斑点数分别为1082±105个、1052±85个、1129±98个、1143±140个。对其中36个差异蛋白质点进行了肽质指纹的质谱分析鉴定。结论舌苔的蛋白质组学研究可以为中医临床辨证、中医疗效评价、中药药效学研究及中药新药筛选研究提供具有中医特色的微观指标和科学依据。