农杆菌能够把自身Ti质粒中的一段DNA片断(简称T-DNA)转运到宿主细胞,并整合到宿主基因组中进行表达。T-DNA是以T-DNA-蛋白质复合物(简称T-复合物)的形式经农杆菌两端的四型分泌系统(简称T4SS)转运出农杆菌。农杆菌T-复合物招募蛋白(简称VBP)能够使待转运的T-复合物聚集在T4SS附近,因而影响T-DNA的转运。但是,VBP蛋白的生物化学功能还不清楚,因此,对VBP蛋白的生物化学功能和特性进行研究就显得尤其重要。通过本项目的研究取得了下列结果1)建立了一种方便有效的构建农杆菌突变体的方法,并利用这种方法构建了多种农杆菌VBP蛋白的突变体。2)根据同源性分析和预测,VBP具有核苷转移酶结构域。利用高效液相色谱确定了VBP蛋白具有水解三磷酸核苷酸的活性。3)获得了具有生物学活性的异源表达的VBP蛋白。4)对VBP蛋白的催化特性进行了详细的研究。由于VBP是一个高度保守的蛋白,许多微生物都含有该蛋白的同源蛋白,同时,VBP蛋白也参与部分质粒的接合转移,因此,上述结果的取得不仅对其它生物中VBP同源蛋白的研究具有重要参考价值,而且对质粒接合机理的研究也有重要意义。
英文主题词Agrobacterium tumefaciens; T-complex recruiting protein; T-DNA transfer