尿石症病因未明,其发病率和复发率较高。假设某种病理因素使肾小管上皮细胞的钙通道部分或完全失活,肾小管对钙的重吸收减少,导致尿钙排除增加,可能是尿石症形成机制之一。本研究通过成功制备草酸钙结石SD大鼠模型,利用免疫组化和荧光定量PCR技术检测出实验模型钙通道TRPV5的表达明显减少,且TRPV5mRNA的表达是正常大鼠的0.56倍;通过收集伴有高钙尿的含钙结石患者和正常无结石患者的肾皮质标本,应用免疫组化、Western Blot及RealTime-PCR技术得出前者钙通道TRPV5蛋白表达减少,是后者的0.61倍,TRPV5mRNA是后者的0.248倍;体外成功培养肾小管上皮细胞,鉴定得cytokeratin 18表达阳性,并通过流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度;成功构建GFP标记的兔TRPV5融合蛋白表达质粒,将此质粒转染至细胞内,再利用全细胞膜片钳技术观察钙通道兴奋剂和拮抗剂对HEK293细胞内TRPV5的电流改变,为制定尿石症的防治措施提供了依据。通过本研究我们可以推断肾小管上皮细胞钙通道的表达减弱是尿石症形成的一个原因。
英文主题词calcium channel ;kidney stone disease;