中文摘要：

表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）是21世纪医学发展的重要里程碑之一，然而，EGFR-TKIs的获得性耐药是影响临床NSCLC治疗效果的重要因素。相关研究揭示NSCLC细胞对EGFR-TKIs产生耐药的同时伴有胰岛素样生长因子1型受体（IGF-1R）、Akt磷酸化的增加和上皮－间质转换（EMT）。鉴于IGF-1R可介导肺癌等多种肿瘤细胞EMT的产生，我们首次提出科学假设NSCLC细胞IGF-1R的激活可能参与对EGFR通路的旁路激活及诱导细胞EMT而导致对EGFR-TKIs耐药。本项目拟采用EGFR-TKIs敏感及耐药细胞株，通过RT-PCR、Western-blot、基因转染及敲除等方法阐明IGF-1R及EMT在EGFR-TKIs耐药中的重要作用，为逆转EGFR-TKIs的耐药过程及提高其靶向治疗NSCLC疗效提供更充分的科学依据。

结论摘要：

获得性耐药已经成为表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的瓶颈。目前已经明确的获得性耐药机制包括T790M突变和MET基因扩增，但仍有30%~40%耐药机制尚不明确。新近研究发现，肿瘤细胞上皮-间质转化（EMT）及胰岛素样生长因子1型受体（IGF1R）的激活与NSCLC细胞EGFR-TKIs获得性耐药密切相关。我们的前期临床研究显示EMT和IGF1R与Gefitinib敏感性有关，EMT或IGF1R表达阴性的病人其客观缓解率和疾病控制率较表达阳性的病人均有所提高。IGF1R和EMT均与NSCLC发生EGFR-TKI获得性耐药有关，但目前关于IGF1R活化与EMT产生的因果关系及其介导的EGFR信号旁路激活在NSCLC细胞对EGFR-TKIs耐药过程中的作用尚不明确。本研究同时选用EGFR突变型和野生型NSCLC细胞，通过EGFR-TKI诱导耐药后，观察耐药后细胞EMT及EGFR、IGF1R信号通路相关分子的变化，以期探讨IGF1R和EMT在非小细胞肺癌细胞对EGFR-TKIs产生获得性耐药中的作用和机制。结果显示1、IGF1R信号通路的激活是EGFR-TKI获得性耐药的主要机制之一；2、EGFR-TKI获得性耐药后细胞出现EMT转化；3、外源性TGF-β1刺激PC-9及H460后细胞出现EMT表型，并对EGFR-TKI的敏感性下降。4、通过慢病毒转染LV-CDH1使PC-9/GR及H460/ER细胞E-cadherin高表达可逆转EGFR-TKI耐药及EMT。5、IGF-1作用PC-9和H460细胞后激活IGF1R，同时细胞发生EMT，并对EGFR-TKI的敏感性下降。6、IGR-1R通过下游Erk/MAPK通路诱导EMT而导致NSCLC EGFR-TKI获得性耐药。总之，我们研究证实IGF1R是EGFR-TKI获得性耐药的机制之一，其主要通过诱导细胞发生EMT产生EGFR-TKI耐药。抑制IGF1R通路可能成为逆转EGFR-TKIs耐药及提高其靶向治疗NSCLC疗效的新策略。