中文摘要：

脓毒症（sepsis）是临床常见的危重症和重要死因，能否及时准确的诊断、治疗直接影响患者的生存率。MiRNAs是近年新发现的一种在转录后水平调控mRNA表达的小RNA，在人体免疫调控方面可能具有重要的作用。本课题按照28天病死率将脓毒症患者分为生存组与死亡组，利用solexa 测序测定生存组与死亡组血清样本中差异表达的miRNAs，然后利用qRT-PCR验证筛选结果，以期筛选客观反映脓毒症预后的MiRNA；在此基础上采用过表达、抑制表达和细胞侵袭能力等方法对筛选的miRNAs进行功能研究。本研究旨在筛选鉴定可以评价脓毒症预后的miRNAs，研究其功能，同时预测并验证新的miRNAs，并研究部分免疫调节相关的新miRNAs在脓毒症发病过程中的作用，最终确定这些miRNAs的作用靶点，为脓毒症治疗的潜在的新靶点提供科学依据。

结论摘要：

脓毒症是临床常见的危重症和重要死因，但其临床表现较为多样，且缺乏特有的临床表现，能否及时诊断和治疗直接影响患者的生存率。在发病过程中，淋巴细胞凋亡是导致机体免疫功能异常的重要原因之一。 微小RNAs（miRNAs）是一类内源性的非编码小RNA分子，是近年来新发型的一种在转录后水平调控mRNA表达的小RNA，在人体免疫调控方面具有重要作用。我们前期研究发现在人类体液中的一类循环miRNAs，可以作为脓毒症诊断与预后评估的生物学标记物。然而，其淋巴细胞功能变化在脓毒症疾病发生发展过程中的作用需要深入研究。本课题的主要研究内容是筛选出可以评价脓毒症预后的 miRNAs，并明确其作用靶点及作用机制，为脓毒症的早期治疗提供新的靶点；同时鉴定新的 miRNAs，以期通过 qRT-PCR 验证其存在性，并研究其在脓毒症发病过程中的作用，为脓毒症治疗的潜在的新靶点提供科学依据。本课题在前期研究的基础上，利用miRNAs芯片筛选发现，miR-297和miR-574-5p在脓毒症患者生存组和死亡组间差异表达，而miR-574-5p和APAHCHE II评分联合预测脓毒症病死率具有较好的敏感性和特异性。经过Solexa测序等生物信息学分析和生物信息学分析后筛选到6种新的miRNAs（miR - 223， miR- 15a，miR -16，miR -122，miR - 193b*和miR- 483 -5p）与脓毒症的预后相关, 6种miRNAs联合预测脓毒症病死率的价值较高。而miR-223与miR-16是脓毒症的独立的保护因子，且miR-16预测脓毒症患者病死率的价值最大。ACVR2A 和MAP2K1是预测的miR-223，miR-15b和miR-16的靶基因。miR-122同脓毒症过程中凝血功能紊乱相关，其中与抗凝血酶III高度负相关。经过靶基因预测，ACVR2A、FOXO1、IHH、STK4和DUSP3作为最终筛选得到的预测靶基因，进一步研究发现ACVR2A和FOXO1的表达量在正常对照组，脓毒症组，重症脓毒症组和脓毒性休克患者之间差异表达（p<0.01)。并且FOXO1， ACVR2A，IHH和STK4在脓毒症患者生存组和死亡组之间差异表达。四种蛋白联合诊断脓毒症患者病死率的曲线下面积高达0.875，远高于APACHE II评分和SOFA评分。