中文摘要：

以马尾松为材料，用RACE方法获得马尾松银松素合酶全基因，测定其序列。将该基因克隆到大肠杆菌中，诱导表达，检测酶活，判断该酶属于银松素合酶还是双氢银松素合酶。截取该基因的启动子部分，有计划切除5'末端，与GUS报告基因连接，成为嵌合基因，转入烟草，检测转基因烟草对不同诱导因素紫外照射，损伤，病原体攻击，胁迫激素施加的反应情况，分析该基因的调控结构。为银松素合酶表达强度与松树抗性相关等问题提供更多

结论摘要：

从马尾松（Pinus massoniana）中克隆出银松素合酶的全长cDNA片段（PSR），编码一个由393个氨基酸组成的PS蛋白。构建了PS基因的植物表达载体。通过农杆菌介导的方法转化烟草。用PCR的方法，克隆PS基因的gDNA，获得长1667 bp（PSD1）和1349 bp（PSD2）的基因全长序列。用连接介导的染色体步行技术，克隆了全长1768 bp的马尾松PS基因上游调控序列。结果表明，该序列可能存在1个TATA-box、1个CAAT-box.、2个GATA-box和1个GAGA-box、1个G-box以及3个类似activator P of flavonoid biosynthetic genes和若干个TGAC-like序列等顺式作用元件。将上游调控区从5′端分别缺失0 bp、350 bp、775 bp、1051 bp片段，构建了四个双元植物表达载体。体外转录合成带地高辛标记的反义RNA探针；与马尾松根、茎、叶组织进行原位杂交，结果表明，该基因的转录表达主要集中在茎的韧皮部和形成层及针叶的韧皮部。紫外线照射和酵母提取液处理均可使该基因的转录表达水平明显增加。