本项目以甘蔗为研究对象,克隆了表达蔗糖磷酸合成酶基因(SPSⅢ)的甘蔗SPSⅢ基因cDNA序列和DNA序列,研究了基因的结构并预测了功能;通过拟南芥异位表达,开展了甘蔗SPSⅢ基因的过表达研究;研究克隆了甘蔗SPSⅢ基因1.4Kb的5'侧翼序列,预测到大量与光响应有关的的顺式调节元件(如ACE 、ATCT-motif、AE-box等)和一些与组织发育相关的序列;研究开展了缺失表达分析,初步筛选出15个与其作用的特异转录因子;研究了SPSⅢ在成熟期蔗茎中转录表达的规律,结合定量PCR和糖分检测,分析蔗茎中蔗糖积累与SPSⅢ转录水平的相关性。研究发现并初步验证了甘蔗SPSⅢ前体mRNA可变剪接体现象;研究还对甘蔗SPSⅢ家族基因光暗磷酸化调控位点的机制开展研究。本项目的研究将为评估SPSⅢ基因作为候选基因应用于甘蔗基因工程改良提供重要的理论参考。
英文主题词sugarcane;SPS;expression;transcription