肿瘤标志物的灵敏和快速检测对肿瘤的早期发现、治疗,以及预后和复发的监测具有重要意义。本项目以建立肿瘤等重大疾病标志物的高灵敏检测技术为目的,基于双层磷脂膜和ITO电极,建立了抑制免疫分析中非特异性吸附的方法和超灵敏置换免疫分析技术;根据碱基在纳米材料修饰电极上的直接电催化氧化性质,结合重亚硫酸盐对甲基化胞嘧啶的特异性反应和限制性内切酶对特定序列的识别作用,以及DNA单碱基错配检测技术,在DNA整体甲基化水平,特异位点甲基化水平,以及p53肿瘤抑制基因甲基化状态的电化学检测方法取得新进展。同时,根据蛋白质在变性剂诱导下,结构变化引起生物活性和催化能力改变实现信号ON/OFF状态的控制,研究了自组装单层性质对血红蛋白直接电子传递行为的调控;探讨了氯离子、酸、尿素、盐酸胍等变性剂对血红蛋白去折叠的作用机制;进一步通过控制蛋白质结构,实现了对酶分子催化能力的调控和对富勒烯纳米材料的有效助溶,为设计电化学分子信标体系提供了新思路。本项目的研究将有助于肿瘤标志物的灵敏快速测定,为疾病的早期诊治提供新手段和依据。
英文主题词Electrochemical molecular beacon; tumor markers; DNA methylation; immunoassay