利用TMV表达载体构建棉疫病菌的cDNA文库,然后进行体外转录,以体外转录产物摩擦接种烟草(nn),通过功能筛选策略筛选表现过敏反应的枯斑,提取RNA,采用RT-PCR扩增插入的cDNA片段,序列分析,并以此cDNA为探针筛选cDNA文库获得全长基因,原核表达验证其作为激发子的功能。研究结果将为揭示植物对棉疫病菌非寄主抗性的分子机制奠定基础。
利用病毒表达载体构建棉疫病菌的cDNA文库,然后转化农杆菌,采用牙签穿刺接种本氏烟叶片,通过功能筛选策略筛选可诱导过敏反应的阳性克隆,进一步采用PCR和RACE方法克隆阳性克隆的全长的gDNA和cDNA序列,原核表达验证其作为激发子的功能。研究结果将为揭示植物对棉疫病菌非寄主抗性的分子机制奠定基础。