中文摘要：

分离纯化破坏胰岛微环境及微血管导致的胰岛移植物原发性无功能（PINF）是阻碍胰岛移植进展的重要因素。前期研究发现微环境调控法可以诱导骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）分化为胰岛素分泌细胞；未分化与已分化细胞共同移植可明显改善分化后细胞功能及微血管再生。结合国际低氧刺激结合HGF启动BM-MSCs分化修复功能报道，我们设想构建HGF高表达BM-MSCs并反复低氧预处理（HA-BM-MSCs-HGF），同时采用已建立的微环境调控三步法诱导建立HA-BM-MSCs-HGF胰岛损伤修复界面，在已建立的临界剂量胰岛移植模型基础上，研究此界面在补充移植量、营养支持胰岛及促进微血管再生等多途径、多靶点阻遏PINF发生及发展及改善胰岛移植物功能的作用及效率，并通过相关信号通路检测探讨其可能机制。最终达到减少移植供受体比例和移植成本的目标，为推动胰岛移植奠定实验基础。

结论摘要：

分离纯化破坏胰岛微环境及微血管导致的胰岛移植物原发性无功能（PINF）是阻碍胰岛移植进展的重要因素。本课题主要的设想是在已有研究基础上，建立以骨髓间充质干细胞低氧启动诱导的胰岛损伤微环境调控修复界面，从而研究其在体内体外改善胰岛功能的可行性。本课题经过3年的研究，已经成功建立了小鼠骨髓间充质干细胞分离纯化培养体系，同时研究发现，低氧诱导启动的修复界面，其在in vitro培养中，我们发现，骨髓间充质干细胞共培养界面或者采用骨髓间充质干细胞条件培养基，可以明显减少体外胰岛死亡、凋亡及功能损伤，in vivo中可明显减少移植后PINF发生的比率，减少降血糖需要的胰岛细胞量；而低氧启动的骨髓间充质干细胞，其对胰岛的保护作用更加明显。相关这部分研究的数据，已撰写成文，正在投稿中；同时，我们在上述研究的基础上，进一步追踪国际进展，目前胰岛移植的一个重要难点是无法早期鉴别诊断胰岛移植物原发性无功能及胰岛免疫排斥反应；由此我们在上述研究建立的临界剂量胰岛移植模型基础上，采用 Affymetrix公司的Mouse genome array检测模型鼠外周血白细胞表达谱差异，全基因组聚类分析获取同基因移植组与异基因移植组的基因表达差异，并通过定量PCR验证，寻找一组可以用于早期鉴别诊断胰岛免疫排斥反应的基因组合。并且，我们进一步建立了自主研发的PVP-SPIO标记MRI技术监测胰岛移植物的有效方法。发现我们自主合成的PVP-SPIO，其理化性质超顺磁性明显优于Feridex（商用SPIO MRI标记物），具有良好的生物相容性在有效标记浓度下，对胰岛细胞的活性、增殖和胰岛素分泌功能没有明显影响，可进行有效的活性胰岛的体内体外的标记；上述研究结果已发表。通过本课题研究，进一步阐明了低氧诱导的骨髓间充质干细胞培养界面对胰岛移植的功能保护作用；并为未来进一步研究有效的胰岛移植物功能及免疫排斥反应的发生发展的监测奠定了基础。