腹膜纤维化导致超滤衰竭是长程腹膜透析技术性失败的关键因素,通过防治腹膜纤维化,可有效提高腹膜透析的远期疗效。本项目是在前期应用中医药阻抑早期腹膜纤维化、间皮细胞间质转化并取得较好疗效的基础上,基于水通道蛋白1(AQP1)是腹膜水转运的主要通路,针对目前腹膜纤维化中对AQP1研究的不足,确立腹膜间皮细胞和毛细血管内皮细胞AQP1表达为研究核心,围绕"水通道蛋白表达的改变反映了腹膜纤维化的病理进展过程且体现腹膜纤维化病变程度"这一假说,结合三焦枢机不利、瘀滞水停为腹膜纤维化的病机关键,选用临床疗效显著的"肾疏宁"为研究载体,采用人腹膜间皮细胞和毛细血管内皮细胞体外培养技术,从细胞、蛋白、基因等层面,应用流式细胞仪、蛋白质印迹、RT-PCR、透射与扫描电镜等检测技术,探究AQP1表达与腹膜纤维化的相关性及中医药阻抑早期腹膜纤维化、调控AQP1表达的作用机制,为中医药防治腹膜纤维化提供创新性思路。
AQP1;shenshuning;PMCs;PMVECs;Peritoneal fibrosis
采用体外培养人腹膜间皮细胞及人腹膜毛细血管内皮细胞的方式,同时制备肾疏宁含药血清,运用腹膜透析液、肾疏宁含药血清干预腹膜间皮细胞及腹膜毛细血管内皮细胞。通过实验研究证实含糖腹膜透析液、中药复方肾疏宁含药血清均能提高腹膜间皮细胞及腹膜毛细血管内皮细胞上AQP1的表达,且含肾疏宁组较含糖腹透液组对腹膜间皮细胞及腹膜毛细血管内皮细胞上AQP1的表达增高明显,证实含糖腹透液、肾疏宁均能明显提高AQP1的表达,且肾疏宁更能明显提高腹膜间皮细胞及腹膜毛细血管内皮细胞上AQP1的表达。在对致纤维化的蛋白及因子的研究中发现,含糖腹透液组均可增加腹膜间皮细胞相应致纤维化的蛋白及因子的表达,但在含肾疏宁组致纤维化的蛋白及因子的表达相应的下降,证实肾疏宁在抑制腹膜透析腹膜纤维化方面有一定的作用。所有研究要点均按计划如期完成。在此期间已发表期刊文章4篇,完成硕士毕业论文4篇。