中文摘要：

肺癌是当今世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。临床上由于缺乏早期特异性的诊断指标，70%病人在局部肺癌晚期或发生转移时才被确诊。我们采用SELDI蛋白质芯片技术从肺癌病人血清中已成功筛选出15个肺癌标志蛋白。本课题在上述研究的基础上，采用LCM和SELDI蛋白质芯片技术，从肺癌病人组织中筛选肺癌标志蛋白，挑选部分标志蛋白进行质谱(MS/MS)分析和蛋白质数据库查询，获得其氨基酸序列。对其中新的蛋白或功能未确定的蛋白或功能蛋白合成相应的引物，从自行构建的肺癌细胞的cDNA 文库中钓取其cDNA全长或通过5'RACE 延伸获得其全长cDNA序列。构建cDNA表达质粒和RNAi表达质粒，分别转染不同的肺癌细胞株，检测转染细胞的增殖情况、恶型表型，以及细胞同步在G1期时的蛋白质谱变化。上述内容的研究将为阐明肺癌发生的分子机理奠定理论基础，同时为肺癌的早期诊断、治疗和控制肺癌复发与转移有重要的指导意义。

结论摘要：

肺癌是当今世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。临床上由于缺乏早期特异性的诊断指标，70%病人在局部肺癌晚期或发生转移时才被确诊。采用LCM、DDRT-PCR、SELDI-TOF-MS、1D/MS和2DE/MS等技术从肺癌病人的组织、血清和体外培养的具有不同转移能力的肺癌细胞系中筛选和鉴定出18个标志分子。发现其中一个差异基因prol4与肺癌发生密切相关，进而对其生物学功能进行了的研究。结果显示prol4可使转染的肺癌细胞生长加快，S期和G2/M期明显缩短。对筛选和鉴定出的16个差异蛋白中的两个LDHB和SAA进行了上百例临床样本的验证，发现SAA和LDHB的血清表达水平随着病人病情加重或转移而表达升高；发现并鉴定了一个与肺癌病程密切相关的自身抗体anti-U1-A snRNP。上述研究结果不仅为阐明肺癌的发生和转移的分子机理研究提供了有重要价值的实验数据，而且筛选到的肺癌标志蛋白将为临床诊断和药靶筛选提供依据。