本项目瞄准国际上P450与昆虫抗药性关系这一研究热点,以目前粮仓中严重危害的书虱类害虫嗜卷书虱为研究对象,综合运用昆虫生理生化和分子生物等学科知识,借助相关最新的分子生物学研究手段,利用细胞色素P450的可诱导性,比较研究书虱敏感品系、抗性品系及诱导品系对有机磷类常用杀虫剂及PH3的敏感性差异;应用RT-PCR及RACE技术克隆书虱P450基因的全长序列,结合Northern杂交和RT-qPCR技术解析其mRNA在嗜卷书虱不同发育历期和不同品系的表达模式;通过不同品系P450等位基因的序列比对进而找出与抗性相关的突变位点;通过P450的异源表达并分析表达产物(酶)的酶学特性;最终阐明P450介导书虱代谢抗性的分子生物学机制。最后应用PCR-RFLP及RT-qPCR技术建立自然种群抗性的分子诊断技术。
英文主题词Liposcelis bostrychophila; P450; gene cloning; expression; resistance diagnosis