病毒编码的基因沉默抑制子是研究病毒与寄主相互作用的良好的切入点。在本项目中,我们以CMV 2b为模型,1.研究了它与RNA沉默途径、水杨酸抗病途径及miRNA调控体系的互作,取得了创新性结果,完善了CMV与寄主相互作用的工作模型。在2b与RNA沉默效应因子 AGO的互作中,发现2b能与AGO4互作,说明2b除了能抑制PTGS外还能抑制TGS;在与水杨酸抗病途径互作中发现过表达RDR1的烟草对CMV高度感病,RDR1具有基因沉默抑制子活性;在2b与miRNA途径的互作中,发现2b主要通过提高miRNA*链的积累而影响AGO1活性。 2.完成了2b结构与功能的研究目标。通过抑制子活性强的SD2b和抑制子活性弱的Q2b的三个肽段的互换分析,发现在SD2b的一个10个氨基酸肽段是其的抑制子活性的主要决定因子。该肽段还在2b抑制AGO4基因转录中起主要作用,再次说明2b能抑制TGS。 3.完成了在植物体内表达针对2b的人工miRNA、建立抗CMV新途径的研究目标。还进一步拓展了利用人工miRNA降解CMV 3'-UTR的抗病性策略,获得了高效抗病毒的植物。上述研究的部分结果已发表7篇论文。
英文主题词Virus-host interaction; RNA silencing; CMV silencing suppressor 2b; 2b functional determinants; Novel anti-CMV strategy