茶叶中的儿茶素等酚类物质,既是茶树特殊的次生代谢产物,也是构成茶叶品质和健康功效的主要化学成分。本项目研究对开展儿茶素生物合成的基因调控、开拓茶树育种新途径具有重要理论价值。主要研究成果如下(1)在酯型儿茶素合成和水解机理上取得突破性进展,首次证实酯型儿茶素生物合成和水解途径;(2)利用HPLC/MS、酶学检测、蛋白质组分析和基因表达差异分析技术,对不同环境诱导(光照、蔗糖处理等)、不同器官间和不同发育时期叶片中儿茶素等酚类物质的积累、关键酶变化及主要基因表达差异进行了比较研究;(3)利用活体染色-香草醛盐酸显色技术,研究了茶树不同器官中儿茶素积累的组织定位特点;(4)克隆了16条与茶树酚类物质合成相关的结构和调节基因(已登陆2条);(5)建立和完善了一些重要实验技术平台,包括茶愈伤组织诱导、筛选、再生培养、超低温保存技术;ANR、DFR/LAR、酯型儿茶素合成酶、βG合成酶、酯型儿茶素水解酶的检测方法;同时检测茶树酚类物质的LC-TOF/MS等分析方法;qRT-PCR、SSH、AFLP、RACE、基因体外表达以及遗传转化等分子生物学技术;简易的茶树儿茶素组织定位方法。
英文主题词Tea plant[Camellia sinensis (L.)]; catechins;biosynthetic pathway; gene regulation; new gene cloning