中文摘要：

抑癌蛋白p53和Rb在细胞周期调控、细胞凋亡、DNA损伤修复等过程中发挥重要的生物学功能。本课题组经人胎肝大规模测序得到新型人源p53和Rb结合蛋白PACT。经分析，含有SR富含区、锌指及锌指环结构域，以PACT为诱饵酵母双杂交筛选得到与RNA剪接和SUMO化相关的分子。拟采用蛋白相互作用、SUMO修饰酶活性测定、对S100细胞抽提液剪接功能补偿测定等技术，探讨PACT是否参与RNA剪接及是否为S

结论摘要：

抑癌基因p53感应多种类型的细胞应激，调控细胞周期进程与细胞凋亡，过高的p53活性可引起严重的细胞学后果，因此p53活性的严谨控制对于细胞的生长是必须的。PACT(睾丸来源的p53结合蛋白，也称作P2P-R, RBBP6)是一个250kD的RING锌指蛋白，可直接结合p53和Rb。PACT在食管癌中高度上调表达，是一种潜在的免疫治疗的靶分子。但是PACT-p53相互作用的生理意义一直不清楚。我们的研究揭示pact基因敲除的小鼠胚胎致死于E7.5，伴随p53的积累和大量的细胞凋亡。p53敲除可部分挽救pact敲除小鼠至E11.5。分子水平上，PACT可以与HDM2相互作用，增强HDM2与p53的亲和力，加速HDM2介导的p53泛素化及蛋白质降解，从而下调p53蛋白稳定性。相一致的，PACT抑制p53依赖的基因转录。RNAi介导的PACT敲低显著削弱p53-HDM2相互作用、降低p53泛素化、增强p53蛋白稳定性，导致细胞凋亡与生长阻滞。总之，我们的研究结果证实PACT-p53相互作用在胚胎发育和肿瘤发生中具有重要的作用，确认PACT是一个重要的p53负调控分子。