中文摘要：

本课题通过研究牵张负荷对膀胱ICC细胞兴奋性的影响，探讨了膀胱自发性兴奋起源及逼尿肌不稳定膀胱中ICC的数量与功能的变化。成功构建豚鼠膀胱颈梗阻DI模型，免疫荧光染色、流式细胞以及扫描电镜鉴定DI膀胱中的ICC数量、分布均较假手术组有变化。RT-PCR和Western-blot检测DI组动物的膀胱C-kit转录和表达显著高于假手术组膀胱。成功设计制作细胞体外牵张负荷培养装置。体外培养、鉴定的ICC细胞在Fluo-4染色负载后可观察到类似"慢波"样的钙信号周期性变化，牵张负荷刺激下，ICC样细胞出现兴奋性钙信号变化，较平滑肌细胞更为敏感。通过去除胞外钙离子、2-APB和ruthelium red 的干预表明胞外无钙状态和ruthelium red(10μM)均可显著抑制ICC细胞自发性钙活动和牵张诱导的钙波，而2-APB(10μM)则可将其完全阻断，膀胱ICC自发钙波的形成需要胞外钙内流以及胞内钙库释放钙离子的整合，而机械牵张诱导的钙波则主要依赖胞内IP3敏感钙库的作用。综上，ICC是膀胱自发性兴奋的关键因素， ICC细胞的数量、结构、兴奋性的变化在DI的发病机制中发挥了重要的作用。