中文摘要：

治疗后肿瘤的高复发倾向是肝癌治疗的最大难题之一。本研究利用坏死肿瘤细胞免疫原性显著增强、热效应可诱导肿瘤细胞热休克蛋白（HSP）表达的特点，建立热消融后原位接种树突状细胞（DC）诱导产生抗肝癌主动免疫的新方法，达到有效预防肿瘤复发的目的。制作小鼠皮下移植性肝癌模型，微波凝固治疗后于肿瘤边缘带接种未成熟DC，观测消融肿瘤、再接种肿瘤或其它未消融肿瘤生长及鼠存活率，证明消融治疗联合原位接种DC能有效防止复发，抵抗再接种肿瘤的攻击，并能抑制已存在的肿瘤生长。通过检测HSP表达、CTL杀伤活性、肿瘤组织T细胞的浸润程度、DC示踪试验等，证明原位接种的DC能有效地摄取消融坏死肝癌细胞表达的肿瘤抗原，诱导抗肝癌的特异性主动免疫，阐明产生抗瘤效应的机制。据此建立消融治疗与DC免疫治疗相结合的新方法,预防肿瘤复发。

结论摘要：

治疗后肿瘤的高复发倾向是肝癌治疗的最大难题之一。本研究探讨肝癌微波消融对宿主免疫效应的影响，以及消融灶内接种树突状细胞（DC）增强主动免疫、防治肝癌复发的可能性。我们对小鼠皮下肝癌模型进行微波消融，结果表明1）微波消融可促进Th2/Th1偏移及NK细胞显著升高；2）消融温度在40～50 ℃范围内，小鼠肝癌热休克蛋白（HSP70）的表达随温度升高而增多；3） 50～55 ℃消融虽能诱导抗肿瘤免疫应答，但尚不能抑制再次接种肿瘤的生长。进一步研究表明与单纯消融组或单纯瘤内注射DC组相比，消融灶内注射DC组的小鼠外周血CD4+T、CD8+ T 细胞、NK 细胞水平和脾淋巴细胞杀伤率均明显升高，说明消融结合瘤内注射DC可显著增强抗肿瘤的免疫学效应。另外，我们还发现消融结合瘤内注射HSP70亦能明显增强机体的抗肿瘤免疫作用。结论在确保肿瘤完全灭活的前提下，适当控制消融温度，有助于诱导宿主主动免疫反应，但尚不能完全抑制肿瘤复发，而结合消融灶内接种DC或注射HSP70，可显著增强主动免疫效应，抑制再接种肿瘤的生长。本研究为肝癌消融结合免疫治疗防治肝癌复发提供了实验室依据。