中文摘要：

变应性疾病是常见病，但发病机制未明，治疗效果也不满意。树突状细胞（dendritic cell，DCs）是启动免疫反应的关键细胞，因此利用DCs进行免疫治疗一直是临床探讨的课题。文献报道和我们初步的研究提示，骨髓未成熟DCs（immature DCs, iDCs）可分化为成熟DCs（mature DCs, maDCs）和调节性DCs（regulatory DCs, DCregs）两类细胞；DCs经体外提纯抗原预处理后免疫标志物改变，对Th2细胞反应减弱。我们据此假设 DCregs经体外抗原预处理形成一种新型的DCs -"抗原-DCregs"，后者对抗原刺激引发的Th2细胞反应减弱。我们将建立小鼠呼吸道高反应性模型，将"抗原-DCregs"回输动物体内，研究其回输后对后续抗原刺激的Th2细胞反应，评估利用"抗原-DCregs"治疗变应性疾病的机制，为气道炎症的免疫治疗开辟新的途径。

结论摘要：

变应性鼻炎（AR）是一类由IgE介导的以Th2免疫反应为主的鼻黏膜慢性炎性疾病。其不断攀升的发病率及其对社会和个体的影响，进一步推动了国内外学者对AR的病因学和免疫机制的研究。抗原刺激、有效信息传递（抗原提呈）、Th2细胞发挥作用等构成了变应性疾病发病的基本环节。树突状细胞（dendritic cells, DCs）是目前已知的功能最强大的专职抗原提呈细胞，因其在变应性疾病发病过程中发挥免疫调节和免疫抑制双重作用而备受瞩目。本课题重点探索抗原刺激的抑制性树突状细胞（又称调节性树突状细胞 regulatory DCs， DCregs）回输变应性鼻炎小鼠体内抑制变应性疾病发生的机制。联合基础致敏和滴鼻激发的方法，建立小鼠变应性鼻炎模型，采用症状学评分，鼻粘膜常规HE染色以及血清OVA特异IgE的表达等方法进行综合评估，明确模型制造成功。体外成功培养出骨髓来源的DCs，通过加入不同的细胞因子，诱导分化为功能不同的细胞，即未成熟树突状细胞（immature DCs，iDCs）、成熟DCs（mature DCs，mDCs）和DCregs，通过倒置显微镜，流式细胞仪，ELISA以及荧光定量PCR的方法，对细胞的形态、功能进行评估和鉴定，以上结果均印证了DCregs发挥重要的免疫抑制作用。 TIM4是TIM1的天然配体，主要由mDCs分泌，高表达的TIM4与TIM1结合，二者相互作用，调节Th2/Th1细胞平衡，诱导变应性炎症发生。本研究检测TIM4在AR小鼠鼻粘膜局部的表达及分布情况，结果发现AR小鼠鼻黏膜局部高表达TIM4，其主要集中在假复层纤毛柱状上皮下层，故而考虑mDCs表达的TIM4在AR发病过程中发挥了重要作用。 DCregs具有抑制免疫反应的作用，然而其是否可以逆转免疫反应，从而达到治疗的效果，仍知之甚少。本研究提取AR小鼠体内Th2细胞，将其与DCregs共同培养，之后检测T细胞因子及表面物质的动态变化，发现DCregs可以逆转Th2细胞，使其向Treg方向分化，从而可以达到免疫治疗的效果。体外分离提纯成功培养的DCs，利用特异抗原对DCs进行体外刺激，使其成为一种新型的DCs，即抗原-DCs，之后将其回输到AR小鼠体内，观察小鼠各项指标的变化，结果显示体内回输抗原-DCregs可以抑制过敏性炎症的发生。