研究生物体内微量元素的化学形态分布对理解微量元素的营养学、毒理学机理及其与相关疾病的关系是十分重要的。本项目在以往工作基础上,使用同步辐射单色光作为光源,建立凝胶基体中蛋白条带内微量元素的X-荧光定量分析方法;考虑基体效应,建立微量元素X荧光强度与含量间关系的数学模型及基体校正程序;结合蛋白质的高效液相色谱、等电聚焦以及非变性二维电泳分离技术,建立方便、可靠的生物样品中微量元素的形态分析方法;并将所建立的方法用于研究人肝组织中金属蛋白的分布特征,为人肝蛋白组学研究提供金属蛋白分布信息。研究的开展可以为微量元素的生物效应研究提供技术基础,同时也可以促进同步辐射X荧光分析技术的发展,拓宽现代核分析技术在生命科学研究领域中的应用。
研究生物体内微量元素的化学形态分布对理解微量元素的营养学、毒理学机理及其与相关疾病的关系是十分重要的。本项目在以往工作基础上,分别用浓缩电泳胶和掺入金属胶作为定量标准,使用同步辐射单色光作为光源,建立凝胶基体中蛋白条带内微量元素的X-荧光定量分析方法,并分析了人血红蛋白等电聚焦分离后各蛋白条带内的金属含量;为提高分析的灵敏度和结果的准确度,对生物样品的电泳分离条件以及分离后的样品制备过程的各个操作环节进行了优化;考虑基体效应,建立微量元素X荧光强度与凝胶组成、金属含量间关系的数学模型及基体校正程序;建立了基于电泳分离(等电聚焦、双向电泳)和同步辐射x荧光分析的生物样品中金属蛋白分布的研究方法。用所建立的方法,研究了若干生物样品(肝癌及癌旁组织、汞污染区鱼肝、富硒酵母)中金属蛋白的分布情况,结果表明肝癌的发生伴随着肝细胞内金属蛋白分布模式的变化;汞污染区鱼肝的汞,硒,砷往往存在于同一蛋白条带内,这些结果为研究微量元素与肝癌发生发展之间的联系,硒汞拮抗的分子机制提供了有益信息。