通过T-DNA插入突变获得致病缺陷突变体A1-412和LY-130,TAIL-PCR分析表明突变体的T-DNA分别插入G蛋白gamma亚基基因(MGG1)上游和MoRIC8基因编码区。MGG1基因置换突变体与A1-412的表型类似,表现为产孢下降、在疏水表面不能形成附着胞,与相应交配型菌株进行遗传杂交不能产生子囊壳,对感病大麦和水稻均无致病性;外加cAMP可诱导突变体形成附着胞,但这些附着胞没有正常功能,不能穿透洋葱表皮,也不能引起病害症状;采用基因C末端GFP标记显示,Mgg1定位于菌丝体和孢子的细胞质中。MoRIC8基因置换突变体的表型也与LY-130一致,表现为生长缓慢、产孢减少、不形成附着胞、丧失致病性,外加cAMP也可部分恢复附着胞形成,但仍没有致病功能。MoRic8主要存在于细胞质,并在附着胞中高水平表达,moric8突变体的G蛋白亚基基因表达明显下调,Y2H显示MoRic8与MagB直接互作。综合上述结果表明,稻瘟病菌G蛋白亚基(Mgg1)在营养生长、产孢、附着胞形成、有性生殖、致病性性中起关键作用,MoRic8则作用于cAMP途径上游调节附着胞形成和致病性。
英文主题词Magnaporthe oryzae; mutants; MGG1; MoRIC8; Functional analysis