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发菜生长发育特异蛋白基因的克隆及功能研究
  • 项目名称:发菜生长发育特异蛋白基因的克隆及功能研究
  • 项目类别:地区科学基金项目
  • 批准号:30760022
  • 申请代码:C020408
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2008-01-01-2010-12-31
  • 项目负责人:梁文裕
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:宁夏大学
  • 批准年度:2007
中文摘要:

研究内容采用细胞培养技术、16S rRNA鉴定技术、多糖的提取技术、柱层析和HPLC技术、双向电泳技术、质谱技术、基因克隆技术、生物信息学方法、蓝藻载体构建和转基因技术,对发菜生长不同状态条件下藻细胞培养进行了优化及分子鉴定,分析了不同状态下的蛋白质表达差异,确定了发菜生长发育的特异蛋白,分离纯化了藻蓝蛋白,进行基因克隆、原核表达和结构与功能分析。研究成果(1)获得了发菜细胞液体培养技术体系;(2)对培养的发菜细胞进行了分子鉴定;(3)分离到了发菜多糖,得到了其光谱学特性;(4)得到了发菜不同生长阶段和"干-湿"不同状态蛋白质表达图谱,分别确定了38和45个差异表达蛋白点;(5)得到了高纯度的发菜生长发育重要蛋白-藻蓝蛋白;(6)克隆了藻蓝蛋白α和β亚基基因、Mn-CAT基因,Hypothetical Protein NXL-01基因并登录了GenBank (GU549478, GU549477, HM854288);(7)对克隆基因进行了原核表达并分析了结构和功能;(8)初步获得了藻蓝蛋白基因反义表达载体并实现了发菜细胞的转化。研究意义为揭示发菜生长发育的分子本质奠定基础。

结论摘要:

英文主题词Nostoc flagelliforme; growth and development; specific proteins; gene colone; functions analysis


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