中文摘要：

本项目针对基因工程抗体亲和力偏低，在痕量农药残留检测领域实际应用困难的突出问题。拟借鉴亲和力成熟技术的高效抗体重组、改性优势，发挥时间分辨荧光免疫分析高灵敏与多组分分析特点，完成以下工作①对已筛选到的苏云金杆菌杀虫蛋白Cry1Ac和伊维菌素（IVM）单链抗体基因，采用错配PCR、定点突变等方法，分别构建2种大容量亲和力成熟库。②采用磁珠液相筛选和游离抗原洗脱等优化筛选技术，分离鉴定出20-30种Cry1Ac、IVM成熟抗体株。比较不同成熟策略效率，分析蛋白及小分子农药特异性抗体在成熟过程中结构修饰差异，预测成熟关键表位。③选择亲和力显著提高或具广谱识别能力的抗体株，经可溶性表达后，建立3-4种高灵敏或广谱Cry1Ac、IVM及其家族同系物的时间分辨荧光免疫分析方法。为农药基因工程抗体亲和力成熟技术做出探索，并建立高灵敏度的农药残留检测方法。