中文摘要：

EIAV与HIV同属慢病毒家族，其基因组与蛋白结构和抗原性等存在较大相似性。EIAV减毒疫苗是世界上唯一大规模应用的慢病毒疫苗，其膜蛋白Gp90存在明显的糖基化位点缺失，降低了病毒毒力并诱导较好的中和抗体。本课题旨在探索改造减毒疫苗膜蛋白糖基化位点对其诱导中和抗体效果。首先构建了EIAV减毒疫苗株膜蛋白未经改造及糖基化位点缺失系列基因工程疫苗，采用DNA初免/痘苗加强策略免疫小鼠，结果显示V3/V4区糖基化位点的缺失的膜蛋白抗原比未经改造的减毒疫苗株膜蛋白抗原所诱导的中和抗体活性降低。采用同样策略免疫马，发现减毒疫苗诱导了较高的中和抗体和细胞免疫反应，在马体内持续存在2年以上，完全保护攻毒动物；而基因工程疫苗免疫后仅诱导了一过性中和抗体，马攻毒后虽延迟了病毒血症发生、降低了病毒载量，但马最终死亡。还发现糖基化膜蛋白抗原存在通过线粒体介导途径诱导细胞凋亡与坏死的风险。上述结果说明膜蛋白在V3/V4区所保留的199/217位糖基化位点对诱导有效中和抗体至关重要，免疫保护性抗原的持续表达是诱导有效的体液免疫保护反应的关键因素，新型HIV疫苗研究中应予以借鉴，对糖基化抗原的潜在毒性亦应关注。