iASPP是一个P53的重要调控蛋白,该基因至少存在两个剪接体iASPP-SV和iASPP(828)。两个剪接体的羧基端一致,氨基端不同。我们在本研究中通过RACE克隆iASPP-SV的5′端,确定iASPP-SV的转录起始区,明确iASPP基因的结构。通过Western Blot证实iASPP-SV和iASPP(828) 在多种细胞系中表达。克隆iASPP基因,构建FLAG1-iASPP-pcDNA3质粒,筛选后获得稳定表达iASPP-SV 和iASPP(828)的3T3克隆。MTT和集落形成能力显示iASPP-SV有更强的促增殖作用。构建pAS-iASPP-SV, pAS-iASPP(828) 和pAS-iASPP,证实抑制iASPP-SV能够增强MCF-7对阿霉素的敏感性。发现抑制iASPP-SV表达,可促进阿霉素作用下MCF-7的BAX表达。通过NF-Kb-luc reporter证实,iASPP-SV和iASPP(828)都能抑制NF-Kb的转录活性。提示iASPP是一个多功能的蛋白,在乳腺癌中主要以癌基因的形式发挥作用。
英文主题词P53; iASPP; NF-Kb