在申请人首次在水稻中鉴别出一种倍半萜烯(姜烯zingiberene)的基础上,了解姜烯合成、释放动态的多样性(基因型、生育期、温度、虫害等的影响,以及昼夜节律、空间特征、部位等),明确姜烯对二化螟成虫触角电位、飞翔行为、产卵、对幼虫驱避性(嗜好性)、抗生性等的影响,综合分析姜烯对水稻与二化螟互作的生态调控作用;明确姜烯异构体与生态功能的关系;克隆、异源表达、鉴定并获得姜烯合成酶基因、进一步探索其分子调控机制。为合理利用富含姜烯的水稻种质资源提供可靠的依据;填补有关姜烯合成酶基因研究的空白,拓展对单子叶植物倍半萜烯类代谢途径、分子调控机理的认识,从而为可能的通过生物技术手段提高水稻的抗虫性奠定基础。
新株型水稻品系植株的最主要挥发物为姜烯,占总挥发物量的20%以上,且总挥发物量显著高于改良稻,后者的烷烃类则高于前者. 营养期和生殖生长期植株间的姜烯释放量没有显著差异。随着温度的上升,水稻姜烯等挥发物释放总量增加。光照对姜烯释放的影响不大。二化螟雌蛾对姜烯的触角电位反应显著高于对照正己烷;雄蛾则没有显著提高。从富含姜烯的水稻品系克隆得到期望的倍半萜烯类合成酶基因片段ZIS1(1803bp)和ZIS2(1539bp),与罗勒姜烯合成酶(AY693646)基因的相似分别为26.1%和24.7%,ZIS1和ZIS2之间的相似性为53.8%;都含有倍半萜烯合成酶基因的保守区DDXXD。ZIS1和ZIS2均在E. coli. BL21中表达,蛋白的大小分别为69KDa和59KDa。该两基因的功能验证正在进行中。二化螟GOBP2保守区核苷酸序列全长1891bp,其中编码核苷酸为423bp,编码141个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为16kDa、4.9;有2个GT-AG结构的内含子;有6个保守的半胱氨酸位点,具有气味结合蛋白的典型特征。在Tn中表达了GOBP2,为蛋白特征化做准备。