中文摘要：

核基质附着区（matrix attachment region, MAR）是染色质被限制酶消化后仍与核基质结合的DNA序列，能保护转录单位不受非相关因子的干扰，提高基因的转录水平，但其调控机制至今仍不清楚。本研究以单细胞真核生物-杜氏盐藻为材料，分离盐藻MAR结合蛋白，克隆其相关基因，并对其在基因表达、染色体包装等方面的调控机制进行研究。这将有助于揭开MAR在染色体包装过程中的作用、探讨MAR对基

结论摘要：

核基质结合区（matrix attachment region, MAR）是富含AT碱基对的非编码序列，对染色体组装有重要的作用，并且能提高转基因的表达水平，但其调控机制至今仍不清楚。本项目以杜氏盐藻为材料，分离盐藻细胞核，制备细胞核基质，提取核基质DNA，构建MAR文库，体外结合实验，筛选出了3个能显著提高外源基因表达的MAR片段。 构建盐藻λgt11表达文库，标记分离的上述强MAR片段，筛选出1个MAR结合蛋白（MBP）的cDNA片段，通过RACE技术克隆出其基因全长。对MBP基因进行体内结构和功能分析证实该基因全长5641 bp，13个外显子，12个内含子，以单拷贝形式存在于基因组中，与染色体包装和rRNA的加工相关。原核表达并纯化MBP蛋白，凝胶滞留分析实验证实表达的MBP蛋白具有MAR结合活性。构建融合绿色荧光蛋白的真核表达载体，转染CHO细胞，对MBP进行细胞定位和表达分析，表明MBP定位于细胞核，富含碱性氨基酸的PKKKKKE和KKKAEAGAADGGAAEEAPKKKKK可能为核定位信号序列。