大黄鱼(Pseudosciaena crocea)为中国特有鱼种,是目前我国海水网箱养殖数量最大、产量最高的鱼种。近年来,随着养殖规模的不断扩大和养殖环境的恶化,养殖病害日益严重,已成为制约大黄鱼养殖业持续稳定发展的主要因素。本项目拟从大黄鱼自身的抗病能力入手,采用抑制性差减杂交与基因芯片技术相结合的方法,筛选并克隆大黄鱼抗病相关的基因,分析基因结构与性质,通过体外重组表达及转染鱼细胞系鉴定其功能,研究大黄鱼抗病相关基因的在体表达及其时空特异性,探讨其抗病的分子机理,为大黄鱼抗病品种的选育和病害防治提供新思路。
大黄鱼是中国特有鱼种,也是目前海水网箱养殖单产数量最大、产量最高的鱼种。然而随着养殖规模的扩大和养殖环境的恶化,养殖病害日益严重,造成了重大的经济损失。开展大黄鱼免疫的分子基础研究,对于解决其病害问题具有重要理论和实际意义。本项目在构建大黄鱼脾cDNA文库、肾差减cDNA文库的基础上,通过对4000余个克隆EST分析鉴定了300多个的基因,包括70多个免疫相关基因。对参与抗原加工与提呈基因进行了深入研究采用蛋白质组技术与cDNA文库筛选相结合的方法,首次证实了鱼类beta2M 参与其抗细菌免疫反应,提出了鱼类MHC I型分子也能参与MHC II型抗原的提呈;首次筛选克隆了大黄鱼gamma-干扰素诱导溶酶体硫还原酶GILT基因,从比较免疫学角度揭示了鱼类GILT基因具有与哺乳类相似的分子结构、表达调控机制、及在MHCII型抗原加工中的功能;明确了大黄鱼PA28?亚基亚基的组织分布、表达调控,及其与MHC class I分子的协同表达模式.筛选到大黄鱼Caspase3/9等凋亡相关基因、抗病毒Mx蛋白、IFI56及抗菌肽Hepcidin、溶菌酶等基因,研究了其表达调控模式及功能。