贲门腺癌在我国及西方许多国家的发病率均呈上升趋势,其早期诊断困难,预后差。虽然肠化生已被公认为癌前病变,但并非所有的肠化生均发生恶变,现有的方法难以筛选和预测高危患者。因此,亟待发现特异性生物标记物,以便及时发现有恶变倾向的高危患者,对其进行定期监测,并对贲门癌达到早期诊断和早期治疗。本项目拟采用蛋白质表达谱差异分析的方法,应用激光捕获显微切割、双向聚丙烯凝胶电泳、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱
背景贲门腺癌的发病率逐年上升,其早期症状不明显,确诊时多已属晚期,预后凶险。目的寻找与贲门腺癌发生、恶性程度和预后有关的蛋白质。方法用导向激光捕获显微切割技术分离贲门腺癌、肠化生和正常柱状上皮细胞,用双向电泳和质谱方法对三者的蛋白质组比较分析,再用免疫组化和免疫印迹方法验证差异蛋白的表达及临床病理意义。结果1建立了导向激光捕获显微切割技术;2获到贲门腺癌、肠化生和正常柱状上皮细胞的双向电泳图谱,并分别检测到905±74(高分化846±52、低分化923±84)、836±50和867±51个蛋白质点,鉴定出72种贲门腺癌相关蛋白和36种差异蛋白;3免疫组化和免疫印迹证实HSP27、60和Prx-2表达于细胞的胞浆中,其表达差异与双向电泳结果趋势一致,HSP27的表达与贲门腺癌的分化程度及淋巴结转移有关,HSP60与Prx-2的表达与其无关。结论1导向激光捕获显微切割技术更适用于蛋白质组学研究;2差异蛋白可能与贲门腺癌的发生、恶性程度和预后有关,为构建其蛋白质组学数据库奠定了基础;3HSP27、60与Prx-2可能成为潜在的、有应用价值的测定贲门腺癌发生、发展和预后的分子标志物。