中文摘要：

本研究以新分离的E.tenella球虫卵囊为试验对象,用亚硝基硫醇类NO供体-GSNO分别处理未孢子化、孢子化不同时间以及完成孢子化的球虫卵囊.以透射电镜观察被抑杀球虫内线粒体、微线以及生物膜等结构的超微变化来探讨GSNO的作用靶点.以聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定被抑杀球虫SOD活性,并用ELISA方法检测球虫卵囊在孢子化过程中（不同时间）Hsp70蛋白的动态表达情况，用RT-PCR方法检测球虫卵囊孢子化前以及完成孢子化后Hsp70 mRNA的表达情况,揭示球虫SOD以及Hsp70表达对球虫抗氧化和热等应激因素的意义,从球虫自身保护系统来探讨GSNO抑杀球虫细胞外发育的作用机理. 作用靶点和机理的阐明可为新型抗球虫药或环境消毒药的开发研制提供基础资料.

结论摘要：

GSNO能够抑制E.tenella未孢子化卵囊的孢子生殖。项目主要内容包括GSNO对卵囊的抑制特性以及GSNO与球虫作用后卵囊超微结构的变化；GSNO对卵囊糖代谢关键酶以及SOD活性的影响；球虫与GSNO作用后凋亡信号与热应激蛋白（HSP70）表达检测。结果表明酸化亚硝酸盐也可以起到与GSNO类似的抑杀作用，常见自由基抑制剂不能干扰GSNO对球虫卵囊孢子生殖的抑制作用，但氧化剂KMnO4、K2Cr2O7与NO清除剂血红蛋白可以消除GSNO对卵囊孢子生殖的抑制作用；GSNO作用于卵囊后，电镜显示线粒体嵴的排列发生一定程度的紊乱。GSNO对卵囊内与呼吸有关的糖代谢关键酶G-6-PD、LDH、MDH以及ACO活性无明显抑制作用或者抑制作用是可逆的；GSNO处理后卵囊内与对照一样仍存在Cu-Zn-SOD活性；卵囊内DNA以及细胞色素C的检测未见凋亡特征；ELISA以及流式细胞术检测表明GSNO没有明显影响HSP70的表达。因此，GSNO对卵囊孢子生殖的不可逆抑制可能是由NO引起线粒体损伤或阻断核酸分裂实现的。