本研究构建了PPARαV227A基因变异的真核表达载体pEGFP-N1-PPARαV227和pEGFP-N1-PPARα227A,转染L02肝细胞,建立稳定表达的细胞模型;并将细胞分成四组野生组、突变组、空载体组和对照组;每组再分为PPARα激动剂WY14643干预组和WY14643不干预组,并用油酸诱导肝细胞脂肪变性模型,分别采用MTT技术、流式细胞术、油红染色和WESTERN BLOT等方法检测各组细胞的增殖、凋亡、细胞脂肪变性程度和相关通路蛋白及信号分子的表达变化,以探讨PPARαV227A变异对肝细胞功能的影响。结果发现(1)PPARα227A(突变型)的细胞增殖活力高于PPARαV227(野生型),提示PPARαV227A基因变异可能是有益的突变;(2)PPARα可诱导RXR和载脂蛋白A-I(Apolipoprotein A-I)的表达。该研究为明确PPARα基因V227A变异的功能及其对机体的影响提供了重要的依据。
英文主题词PPARα;point mutation;hepatocyte;steatosis