产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是大肠埃希菌的重要耐药机制。我们前期在社区首次发现新型ESBL基因,命名为CTX-M-79,进一步研究显示CTX-M-79是CTX-M耐药性进程中重要一环,但对于CTX-M-79是否具有独特的上下游基因结构,是否具有特殊的转移播散能力,是否具有不同的理化特性以及功能特征,尚不清楚。本研究旨在采用质粒接合实验,对CTX-M-79基因进行定位,以及步移 PCR 法对 blaCTX-M-79基因周围序列进行测序,分析其周围序列及可能的转移机制。再进一步研究该基因的功能,我们拟通过克隆表达该基因,对该基因表达的ESBL酶进行纯化,对该酶的功能进行研究,主要包括酶的水解底物谱、等电点分析、Km 值等。通过系统研究全面了解CTX-M-79的特征及功能,为临床治疗感染性疾病及合理使用抗菌药物提供依据,为延缓或控制细菌耐药性的升级提供有益的线索。
Escherichia coli;Extended-spectrum β-lactamase (ESBL);CTX-M-79;ISEcp1;
?产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是大肠埃希菌的重要耐药机制。我们前期在社区首次发现新型ESBL基因,命名为CTX-M-79,进一步研究显示CTX-M-79是CTX-M耐药性进程中重要一环,但对于CTX-M-79是否具有独特的上下游基因结构,是否具有特殊的转移播散能力,是否具有不同的理化特性以及功能特征,尚不清楚。本研究采用质粒接合实验,对CTX-M-79基因进行定位,以及步移 PCR 法对 blaCTX-M-79基因周围序列进行测序,分析其周围序列及可能的转移机制。携带blaCTX-M-79基因的质粒含有一个IncI1复制子和典型的IncI1相关的基因模块,包括转换区域pil,而blaCTX-M-79位于一个3084 bp的ISEcp1转座区域,CTX-M-79编码基因与上游ISEcp1-like插入序列的具有不同的插入点和相隔片段。对于头孢吡肟,33%(4/12) 产CTX-M-79型ESBLs大肠埃希菌产生接种效应。研究发现ISEcp1-like插入序列与产CTX-M-79型ESBLs大肠埃希菌播散密切相关,这将为合理应用抗菌延缓或控制其相关的耐药性提供有益的线索。