中文摘要：

细菌对喹诺酮类的耐药由多种机制引起，2004年报道oqxAB基因编码外排泵可使细菌对环丙沙星等多药敏感性下降。申请者前期研究发现，临床分离肺炎克雷伯菌株中均存在OqxAB外排泵，而部分菌株仍对环丙沙星高度敏感，实时PCR测定发现敏感株的oqxAB表达水平显著低于耐药株；分析基因周边结构，推测oqxAB基因周边的调控子可能参与其表达调控。本研究①通过酶切克隆、定点突变等方法获得oqxAB基因及其周边调控基因的克隆，利用实时PCR技术，阐明调控基因序列及结构改变对oqxAB基因表达水平及耐药表型的影响,揭示其表达调控机制；②通过质粒携带oqxAB基因遗传环境的生物信息学分析，探索耐药基因的起源和传播；③通过最低防突变浓度测定、耐药突变株基因分析，明确oqxAB基因表达在喹诺酮耐药突变选择中的作用。本课题有助于进一步揭示细菌对喹诺酮类的耐药机制，为临床防控耐药菌株的产生和传播提供理论依据。