肾癌循环肿瘤细胞(CTC)与肾癌的转移密切相关,CTC的检测增进了我们对于恶性肿瘤转移过程的理解。但目前尚无一种方法可完全解决假阳性或假阴性较高的问题。本研究将根据当前肿瘤特异性复制缺陷型腺病毒和单细胞分析的最新进展,构建碳酸酐酶IX(CAIX)启动子控制的肿瘤特异性GFP报告基因腺病毒。该腺病毒的复制必需结构E1A受控于CAIX启动子,并用GFP取代E3结构,使得该腺病毒仅仅能够在肾癌肿瘤细胞内复制而不能在正常细胞中复制。并应用CD45染色排除技术消除白细胞影响,计数并显微操作获取GFP+/CD45-细胞。结合当前最先进的单细胞分析技术,从基因水平检测CTC与正常肾组织的差异。本研究如获得成功,将开发出一种全新的CTC检测及分析技术,最大限度降低假阴性和假阳性。为准确检测CTC并予分析,为CTC检测提供新思路。本研究对早期发现肾癌的恶性侵袭、肿瘤的治疗监测、患者的预后评估等具有重要意义。
英文主题词(renal cell carcinoma;Circulating Tumor Cells;Reporter adenovirus;;