中文摘要：

肺癌脑转移是严重影响肺癌患者生存的因素，血脑屏障的存在使脑转移的发生和治疗都具有特殊性，使肺癌脑转移患者的预后非常差。对肺癌脑转移机理的深入研究是探索肺癌脑转移新的预防和治疗方法的基础和前提，具有非常重要的意义。S100B在脑组织中含量丰富，在我们筛选出的肺癌脑转移肺癌细胞株中也发现有高表达，我们推测其可能与肺癌脑转移的发生有密切关系。我们拟应用细胞培养、基因转染、miRNA干扰和动物实验等，对S100B在A549、PC-14、PC-14/B三株转移潜能不同的肺癌细胞株和临床组织中的表达情况进行检测，再借助先前成功建立的特异的肺癌脑转移动物模型，从过表达外源基因和siRNA抑制表达两方面，对S100B在肺癌脑转移中的作用和机制进行深入研究，探索肺癌脑转移的机理，为研发肺癌脑转移预防和治疗的新方法奠定基础。

结论摘要：

根据所申请的课题内容，应用多种方法，从不同的层面对S100B与肺癌脑转移的关系和机制进行了研究，取得了预期的研究结果，按标书所写要求，较好的完成了课题，具体如下 1、应用免疫细胞化学方法，不仅进一步证明了S100B在脑转移肺癌细胞系PC14/B中高表达，还检测到VEGF和MMP-9在PC14/B中高表达。 2、应用RT-PCR和western blot从RNA和蛋白水平，证明了S100B在脑转移细胞系PC14/B中高表达，而在不发生脑转移的PC14及A549中低表达，从不同的层面确证了S100B在肺癌脑转移细胞系PC14/B中高表达。 3、通过粘附、迁移和侵袭能力试验，显示PC14/B的粘附、迁移和侵袭能力明显强于PC14细胞和A549细胞，这也可能与PC14/B发生脑转移有关。 4、用ELISA法检测了30肺癌病人血清中S100B的表达。显示发生肺癌脑转移的病人血清中S100B的表达明显高于非脑转移的病人，也提示S100B可能与肺癌脑转移有关，并具有一定临床的意义。 5、通过载体构建、基因转染等方法，采取下调和上调S100B在特定肺癌细胞中的表达，观察不同的肺癌细胞的多个生物学行为的改变，确定了S100B对肺癌细胞增殖、侵袭、转移等多种生物学特性的影响。 6、用流式细胞仪检测了转染正义和反义质粒后肺癌细胞的周期和凋亡的影响，结果显示下调S100B 表达的肺癌细胞G1期细胞增多，S期细胞减少。相反，S100B上调的细胞G1期细胞减少，S期细胞增多。 7、探索了S100B对肺癌脑转移作用的可能机制。发现转染S100B后，细胞形态由圆形向梭形改变，并出现侵袭性伪足。进一步发现支架蛋白IQGAP1在S100B促进肺癌转移的过程中可能发挥重要作用。还发现S100BsiRNA干扰细胞株中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达量均下调。 8、采用裸鼠左心室注射的方法，分次分批观察了干扰下调PC14/B肺癌细胞中S100B后，肺癌脑转移发生情况的变化；观察了转染上调肺癌细胞PC14的S100B后，其产生的脑转移的发生情况，进一步验证S100B对肺癌脑转移发生的作用。 9、培养研究生4名（博士2名，硕士2名），已发表SCI论文3篇，中文核心期刊3篇。还有2篇SCI论文待发表。 10、所申请经费按要求合理支付完毕。