本研究是在实验室成熟的白桦遗传转化体系和掌握的三萜基因表达特性基础上提出的,拟利用RNAi(RNA干扰)及转基因技术对三萜代谢流进行调控。依据三萜代谢途径,分别构建FPS过表达载体,DS、CAS单基因及共抑制的RNAi表达载体,遗传转化白桦无性系。研究三萜合成前体FPS基因过表达,分支途径DS、CAS分别抑制和共抑制对白桦组织生长、碳源消耗、前体丰度、总三萜合成、组分积累及相关基因表达特性,重点探讨转基因白桦三萜组分积累的消长关系,前体丰度对分支途径的影响及代谢流分配机制。结合信号分子(MeJA、SA)的诱导效应检测DS和CAS RNAi、FPS过表达的稳定性及与其它关键酶之间的关系,并对转基因材料防御性能进行评价,以期初步揭示FPS、DS、CAS在白桦三萜代谢网络中的调控作用及关键结点。本研究尚未见报道,其开展将为白桦三萜类物质遗传改造和生物技术利用提供技术支持和理论依据。
英文主题词Birch Triterpenes;Gene clong;RNAi;metabolic regulation;