外周血间充质干细胞(PB-MSCs)来源充足、取材简便,成为再生医学领域关注的新焦点,有望成为牙周组织再生新的种子细胞来源。本项目拟采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法高效分离培养人PB-MSCs,对获得的干细胞进行分子生物学鉴定;应用根端牙胚细胞的条件培养液(APTG-CM)或/和来自猪牙胚上皮根鞘的釉基质蛋白(EMPs)模拟胚胎期牙骨质发育的微环境,探索体外诱导PB-MSCs向成牙骨质细胞定向分化的方法,建立优化的条件诱导模式;初步通过Western Blot和RNA干扰等方法研究其分化过程中的信号转导机制,寻求定向分化关键靶标;最后采用细胞膜片技术,将定向诱导后的PB-MSCs与牙本质载体复合,植入免疫缺陷鼠体内观察牙骨质再生情况。研究结果可望为PB-MSCs用于牙周组织再生提供理论基础,为仿生微环境条件下成牙骨质细胞定向诱导分化提供新思路,为牙周组织工程、牙根及牙再生开辟新的研究空间。
英文主题词microenvironment;peripheral blood derived mesenchymal stem cells;periodontal regeneration;cementoblasts;differentiation