精子发生是一个由生殖细胞和体细胞精确配合相互作用的过程,而HSL基因敲除小鼠表现为雄性不育是由于生殖细胞缺陷还是体细胞缺陷造成的还不清楚,因为自然情况下二者难以分开。本研究使用精原干细胞移植技术将缺陷型精原干细胞与野生型支持细胞进行人工组合,从而确定缺陷的细胞类型。本研究首先使用HSL缺陷型小鼠作供体精原干细胞,移植到野生型受体小鼠睾丸,然后观察供体生殖细胞在野生型受体睾丸环境中是否能够恢复精子发生,结果在术后三个月观察到缺陷型精原干细胞确实在受体睾丸中部分的重建了生精功能,观察到精原干细胞呈克隆状增殖,但是几乎未见伸长型及成熟精子出现,说明精原干细胞HSL基因缺陷阻碍了精子发生的正常进行,至少是精原细胞分化阶段受阻。然后,使用HSL野生型转基因(GFP)动物作为供体,将正常精原干细胞移植到HSL缺陷型受体睾丸中,同样在三月后观察到具有GFP标记的细胞在HSL缺陷型睾丸环境中成功地实现了归巢并增殖形成整条绿色荧光曲细精管,尽管也能够观察到伸长型精细胞甚至精子,但是动物交配试验未能获得供体来源的仔代。结论,HSL在两种细胞都对精子发生有贡献,但是在生殖细胞的缺失是导致雄性不育的主要原因。
英文主题词HSL; spermatogonial transplantation; recombination of Sertoli and germ cells; tracer