中文摘要：

巴西橡胶树（Hevea brasiliensis Muell-Arg）属橡胶属大戟科，是多年生的异花授粉乔木，遗传学上高度杂合，遗传基础较狭窄。近三十年的杂交育种实践表明，橡胶树杂交改良的成效已降低，其单位产量提高甚微。利用杂种优势是解决目前橡胶树育种瓶颈问题的技术途径之一，但其前提条件是有优良的遗传背景相对纯合的亲本。通过橡胶树多代自交和花药培养的方法均不能得到纯系。小孢子具单倍性和单细胞特点，具促进胚胎发育能力，同时也是植物基因工程中一种优良转化受体。本项目拟建立巴西橡胶树小孢子培养体系并将获取大量的纯合单倍体植株，进而获得纯系并进行优良植株的筛选，为胶树育种提供新材料，也为其分子育种和突变育种提供了物质基础；同时构建胶树小孢子遗传转化体系，有望提高其遗传转化率，获得性状稳定的转基因植株。本项目为橡胶树的育种材料创新、新种质创建、杂种优势的利用和基因工程提供新的思路、途径和方法。

结论摘要：

本项目研究橡胶树游离小孢子培养，探索了小孢子的分离纯化、预处理、供试材料基因型、基本培养基、激素组合、炭源、PH值、培养条件等对小孢子培养的影响，初步获得了利于小孢子分化的最佳配方和小孢子分化的细胞团，经细胞学检测证明其来源于花粉，这些为进一步建立完整的小孢子培养体系提供了良好的基础；以小孢子为受体进行遗传转化,构建了含胚胎生成基因BBM基因的表达载体pBIBBM，摸索出一套转化率较高的橡胶树小孢子电激转化程序；研究橡胶树不同的离体材料绿色荧光背景的影响，探讨了GFP基因在橡胶树遗传转化中的可靠性；比较了海垦2花药与未授粉胚珠愈伤组织诱导及其胚胎发生能力。课题研究结果已在热带作物学报发表文章一篇，获得已授权专利一项，另有二篇文章分别投稿于热带农业科学、植物生理学通讯。