中文摘要：

以抗冻性很强的野生桑树资源- - 蒙古桑为材料，等经低温诱导48h后，提取其幼茎RNA，并反转录为cDNA，以cDNA为模板进行RT-PCR扩增，克隆了桑树低温诱导蛋白基因（Wap25），基因登录号:DQ104333。将Wap25与原核表达载体pGEX-4T-2重组，重组质粒（pGEX-Wap25）在大肠杆菌BL21中获得高效表达。将Wap25与植物表达载体pIG121-Hm重组，构建成了pIG1-Wap25质粒，用农杆菌介导法对抗冻性弱的矮牵牛叶盘进行遗传转化，获得了4个转Wap25的株系。经PCR和Southern检测，4个株系均有杂交信号产生，表明桑树低温诱导蛋白基因已导入矮牵牛中。构建Wap25与绿色荧光蛋白（GFP）的重组质粒，用基因枪法将其转入洋葱表皮细胞，在激光扫描共聚焦显微镜下发现，GFP分散于洋葱表皮的细胞质中，而在细胞核未发现GFP的表达。本研究不仅对推进桑树的基因改良和促进分子育种的实用化具有重要意义，而且为进一步了解植物抗冷抗冻特性、探明木本植物低温应答机理提供理论基础。