应用光动力学治疗后的卵巢癌肿瘤细胞裂解物作为疫苗,免疫同基因型动物和卵巢癌动物模型,观察肿瘤生长情况,检测动物免疫功能的改变;应用蛋白质组学方法,分析卵巢癌肿瘤细胞裂解物疫苗的蛋白表达谱,寻找特异蛋白,并进一步纯化疫苗,为应用于临床肿瘤治疗提供理论依据。本研究具有明显的创新性和广阔的临床应用前景。研究结果不但能阐明光动力学治疗肿瘤的免疫机制,而且更重要的是,可利用这一原理在体外制备肿瘤疫苗,为肿瘤疫苗的制备提供一种全新的、更为有效和安全的方法。
本研究通过一系列的体外和体内试验,探讨PDT治疗后的肿瘤细胞裂解物作为卵巢癌肿瘤疫苗的可行性。首先对疫苗制备过程中的药物浓度、激光剂量、作用时间等进行研究,并检测其安全性;建立接近人卵巢癌临床表现的大鼠上皮性卵巢癌动物模型;其次,研究疫苗体外对大鼠树突状细胞的作用;将PDT肿瘤疫苗免疫同基因型动物模型,观察其对卵巢癌的治疗和预防作用,检测动物特异性细胞免疫功能的改变;最后,对光动力学人卵巢癌细胞裂解物进行蛋白质组比较分析。结果表明,PDT治疗后的肿瘤细胞裂解物沉淀和上清均无致瘤性;PDT肿瘤疫苗体外可促进大鼠骨髓树突状细胞成熟,并分泌IL-12;PDT肿瘤疫苗在大鼠体内诱发了特异性的抗肿瘤免疫反应,对大鼠卵巢癌可以起到一定的预防和治疗作用。两株卵巢癌细胞的PDT裂解物中低分子量区域蛋白点较多,切取34个点,成功鉴定了25个差异表达蛋白质点,代表19种蛋白质。研究认为,PDT治疗后的肿瘤细胞裂解物在体内和体外诱导了特异的细胞免疫反应,是一种有效、安全的肿瘤疫苗;PDT的抗肿瘤免疫作用主要是激发了宿主的特异性细胞免疫反应;对蛋白质组学鉴定的差异表达蛋白还需进一步研究。