中文摘要：

革兰氏阳性（G+）菌体外促炎作用显著弱于G-菌，但G+菌脓毒症炎症反应严重程度及致死率却与G-菌脓毒症相当。已知许多G+菌脓毒症患者会合并内毒素血症，而我们也发现LPS可以使巨噬细胞中识别G+菌胞壁成分的模式受体TLR2和NOD2表达增多、同时增强巨噬细胞对G+菌反应性（致敏作用）；此外LPS与NOD2特异性配体可以协同诱导TLR2和NOD2表达。故我们推测在LPS诱导NOD2和TLR2表达的基础上，NOD2的激活又可显著增强LPS的上述作用，从而使巨噬细胞对后续G+菌刺激的反应性进一步放大，这可能是LPS增强机体对G+菌敏感性、使得G+菌脓毒症病死率居高不下的关键原因。本项目拟首先明确TLR2和NOD2在LPS致敏巨噬细胞对G+菌反应性过程中的关键作用；然后我们将证实LPS和NOD2特异性配体可通过不同信号途径促使NFκB转录激活，这可能是他们协同诱导TLR2和NOD2表达的主要机制。

结论摘要：

内毒素LPS可以显著增强机体对革兰氏阳性（gram-positive, G+）菌的敏感性（致敏作用），这可能是临床上很多G+菌脓毒症的病原菌本身致病性不强、但致死率却很高的原因之一。我们前期研究显示，LPS诱导TLR2和NOD2表达的作用可能是其致敏机体对G+菌反应性的重要机制之一。本研究以此为基础，采用在对巨噬细胞TLR2和NOD2分别进行干扰后检测细胞对LPS的致敏作用。同时，采用TLR2特异性激动剂和NOD2特异性激动剂，研究不同信号通路在LPS诱导细胞损伤中的作用，评价是否TLR2与NOD2在其中起到协同作用。此外，在体实验中，通过尾静脉注射干扰慢病毒，在体研究TLR2和NOD2在LPS诱导损伤中的作用。我们研究发现，对小鼠巨噬细胞TLR2和NOD2分别进行基因沉默后，LPS的致敏作用显著受到抑制，表现为NO和炎症因子产生下降。此外，采用TLR2特异性激动剂和NOD2特异性激动剂进行的研究发现，CaM-NAFT1、MyD88-IRAK→NF？B和MAPKs→AP-1信号通路参与TLR2和NOD2介导的LPS对细胞的损伤作用。在体动物实验也证实，TLR2和NOD2在LPS诱导的器官损伤中发挥了重要的作用，因为给予TLR2和NOD2干扰后小鼠LPS诱导的组织损伤显著缓解。