中文摘要：

生物芯片是生命科学研究与实践中重要的高端技术工具，双荧光标记是目前生物芯片最常用的探针标记方法。但仍然存在着制作成本与外围设备昂贵，经PCR扩增假阳性率高等缺点，特别是在特异性靶核苷酸序列的研究与临床实践中，无法高效、低廉、普及化使用。本研究拟通过制备两种不同种类的金属纳米粒子,标记经修饰的寡核苷酸，制成肉眼可见的红色和蓝色双标记探针，用以制备高密度和低密度基因芯片，使纳米基因探针灵敏度和碱基错配

结论摘要：

本课题通过研究了纳米金与纳米硒胶体粒子的制备，粒径与颜色的最佳匹配选择；寡核苷酸的修饰，修饰后的寡核苷酸与双色纳米金和纳米硒共价结合，结合后的纳米粒子基因探针稳定性和活性等生物学性质的研究；双色纳米粒子基因探针碱基错配鉴别力的研究；双色纳米粒子基因探针在人工合成的靶序列杂交反应和灵敏度研究；选用P53突变阳性临床肿瘤标本，合成与P53突变互补的纳米粒子基因探针，同时合成相应荧光标记探针，研究比较两种探针在临床实践中的应用价值。得出结论制备的探针在常温下至少可以稳定3个月；经结合后的纳米粒子探针的吸光度明显降低，并有明显的差异；非完全互补的靶DNA／纳米粒子探针的Tm值明显降低，并且可以通过解离曲线可以很明确的将它们区分开来；杂交结果直观，背景清晰，有较好的敏感性；短链的寡核苷酸探针用于p53基因突变的检测有较好的光学分辨特性；短链的纳米粒子探针用于基因突变诊断的灵敏度约为91.6%。