中文摘要：

肿瘤多药耐药性是肿瘤治疗失败的最主要原因之一，是世界难题。文献报道糖链在肿瘤耐药性中担任重要角色，然而其详细功能及其调节机制还不清楚。CD147属于免疫球蛋白超家族的跨膜糖蛋白，在肿瘤的生长、侵袭和转移中担任关键角色。我们已证实CD147在人肝癌耐药细胞株中高表达，并调控该细胞对化疗药物的敏感性；CD147去糖基化也增强该细胞对化疗药物的敏感性。本项目拟以人肝癌细胞株及其耐药细胞株为对象，通过检测和比较未知肿瘤耐药靶标CD147与已知肿瘤耐药靶标P-gp、ABCG2糖蛋白在肿瘤耐药作用中的异同点，研究调控耐药功能的部分究竟是来源CD147的核心蛋白还是N-糖链；探讨CD147 N-糖链在肿瘤耐药中的生物学功能及其分子机制；系统地阐明糖蛋白N-糖链在肿瘤耐药性中的变化规律及其功能；确证新的肿瘤耐药标志物，为肿瘤耐药性诊断及抗肿瘤耐药的设计和筛选提供新靶点，为临床逆转耐药提供新对策。

结论摘要：

肿瘤多药耐药性是肿瘤治疗失败的最主要原因之一，是世界难题。文献报道糖链在肿瘤耐药性中担任重要角色，然而其详细功能及其调节机制还不清楚。CD147属于免疫球蛋白超家族的跨膜糖蛋白，在肿瘤的生长、侵袭和转移中担任关键角色，CD147去糖基化也增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本研究发现如下1. 定量PCR─糖基因芯片筛选出白血病及其耐药细胞株186个糖基因中差异表达的糖基因；2. 凝集素芯片（包括43种凝集素）分别检测肿瘤及其耐药细胞株细胞膜上糖链的表达特征，筛选出细胞株中差异表达的糖链；3. MALDI-TOF 质谱分别检测肿瘤及其耐药细胞株细胞膜上糖链组成，筛选出细胞株中差异表达的糖的组成；4. 采用N-糖链抑制剂Tunicamycin、糖苷酶PNGase F分别作用肿瘤及其耐药细胞株，结果发现细胞膜糖蛋白去N-糖链后增强对化疗药物的敏感性；5. 建立特异糖基转移酶基因过量表达、基因沉默的肿瘤及其耐药细胞株，结果发现糖基转移酶基因的表达调控介导肿瘤细胞多药耐药；6. 分别过表达及利用RNAi技术抑制CD147、mdr1、ABCG2基因的表达，结果显示肿瘤耐药相关基因的表达调控介导肿瘤细胞多药耐药；7. 构建CD147 N-糖基化位点突变体表达载体及其稳定表达的肿瘤细胞株，结果发现CD147 N-糖链结构的改变介导肿瘤细胞多药耐药。本研究系统地阐明糖蛋白N-糖链在肿瘤耐药性中的变化规律及其功能；确证新的肿瘤耐药标志物，为肿瘤耐药性诊断及抗肿瘤耐药的设计和筛选提供新靶点，为临床逆转耐药提供新对策。