本研究通过建立豚鼠离焦性近视眼模型,取豚鼠近视眼后极部脉络膜-Bruch's膜-RPE复合体组织,检测RPE细胞间occludin的定位及表达变化,以及该复合体RNA及蛋白质的差异表达。通过以上研究,旨在证实近视发生发展过程中RPE紧密连接结构及功能的变化,并阐明介导近视眼巩膜重塑的信号的可能来源,进而奠定视眼脉络膜-Bruch's膜-RPE复合体在近视信号从神经视网膜向巩膜传递过程中的重要中继地位。
defoucus myopia;chorid;retinal pigment epithelium;complex;signal transduction
本项目通过建立豚鼠离焦性近视眼模型,取豚鼠近视眼后极部脉络膜-Bruch's膜-视网膜色素上皮复合体组织,检测视网膜色素上皮细胞间occludin的定位及表达变化,以及该复合体组织RNA及蛋白质的差异表达。项目研究的意义为证实近视发生发展过程中RPE紧密连接结构及功能的变化,阐明介导近视眼巩膜重塑信号的可能来源。现实验大部分按照预期设计完成,并得到以下实验结果1)成功建立豚鼠离焦性近视眼动物模型,断乳3周的花色豚鼠通过配戴-10D透镜2周可稳定诱导6.25±1.50D的近视漂移。2)明确豚鼠离焦性近视眼RPE紧密连接结构组成蛋白occludin的定位及紧密连接结构形态学的变化,研究发现豚鼠离焦性近视眼后极部脉络膜-Bruch's膜-视网膜色素上皮复合体组织中occludin主要位于RPE层紧密连接处,其免疫荧光较正常值明显降低,蛋白表达亦明显降低。3)明确PKC水平上调及下调对豚鼠RPE细胞occludin mRNA及蛋白质表达的影响。研究发现,PKC水平上调时豚鼠RPE细胞occludin的免疫荧光、mRNA及蛋白质的表达均显著降低;PKC特异性阻断后occludin的免疫荧光、mRNA及蛋白质的表达高于近视组,但仍低于正常水平。本研究证明豚鼠离焦性近视眼视网膜色素上皮细胞的屏障功能下降,PKC参与RPE紧密连接功能的调控,视网膜产生的近视信号可能通过视网膜色素上皮屏障而作用于巩膜,介导近视眼的巩膜重塑。4)研究期间发表相关论文2篇,其中SCI收录1篇。