中文摘要：

本研究在前期证实"益气调血，扶本培元"针法治疗AD确有临床疗效的基础上，以快速老化痴呆鼠SAMP8为研究对象，以神经元线粒体功能为切入点，以针刺对线粒体通透性转换孔(mPTP)开放的调控机制为主线，选取SAMP8小鼠皮层、海马两个记忆相关的关键部位，应用免疫金染色电镜、线粒体荧光探针、Western blot等先进的技术和方法，观测线粒体功能障碍相关指标（钙储存量、跨膜电位、ROS、CytC含量）、mPTP活性及mPTP相关蛋白（Aβ42、CypD、CypD-Aβ复合物、CypD向线粒体内膜募集量）表达的变化，同时观测小鼠学习记忆能力，并进一步观测针刺对上述指标的干预效应，探讨"益气调血，扶本培元"针法通过调控CypD依赖性mPTP的开放，抑制Aβ诱导的氧化损伤和钙超载，从而减轻神经元线粒体功能障碍，提高认知功能的作用机制，为针刺防治AD提供新的切入点和理论依据。

结论摘要：

本研究以以神经元线粒体功能为切入点，应用免疫金染色电镜、线粒体荧光探针、Western blot等先进的技术和方法，观测线粒体功能障碍相关指标（钙储存量、跨膜电位、ROS、CytC含量）、mPTP活性及mPTP相关蛋白（Aβ42、CypD、CypD-Aβ复合物、CypD向线粒体内膜募集量）表达的变化，同时观测小鼠学习记忆能力，并进一步观测针刺对上述指标的干预效应。 得出结果1 通过Morris水迷宫测试得出: 针刺后，SAMP8空间参考记忆得到明显改善,学习记忆的保持及再获得能力显著提高，学习记忆的过程缩短。2 三焦针法可以提高mPTP通道活性。3 三焦针法能明显抑制线粒体内钙离子的超载，对线粒体修复氧化损伤和清除活性氧自由基有一定的作用，维持线粒体正常的跨膜电位能。还可以抑制Cytc从线粒体中释放，减轻线粒体功能障碍，抑制细胞凋亡。4 三焦针法可以抑制快速老化鼠皮层海马CypD向线粒体内膜的募集。5 通过Aβ42、CypD的免疫金染色电镜定位检测得出（1）SAMP8模型组的Aβ42、CypD胶体金颗粒明显多于正常对照组和针刺组；（2）大部分Aβ42、CypD胶体金定位在线粒体膜或嵴上；（3）溶解变性的线粒体上Aβ42、CypD胶体金较多。6 通过Aβ42、CypD mRNA的表达研究得出针刺可以通过减少神经元内CypD 和 Aβ42 mRNA，抑制CypD 和 Aβ42蛋白在神经元内线粒体膜上的结合，而减少mPTP 的开放，改善线粒体功能障碍。7 通过Aβ42、CypD及CypD-Aβ复合物蛋白含量的检测得出SAMP8小鼠神经元线粒体Aβ42、CypD表达量高于正常对照组SAMR1，针刺可明显下调Aβ42、CypD的蛋白表达。针刺抑制CypD-Aβ复合物形成。8 应用TUNEL法检测各组小鼠皮层、海马神经元细胞凋亡情况得出模型组较正常对照组细胞凋亡IHS评分有所升高，针刺组较模型组有下降的趋势。 总之，三焦针法通过抑制神经元线粒体CypD的表达、减少CypD与Aβ复合物的形成，以及CypD向线粒体内膜的募集量， 阻断CypD依赖性的mPTP开放，从而抑制Aβ诱导的氧化损伤和钙超载，减轻线粒体功能障碍，提高记忆和认知功能，为针刺防治AD提供新的切入点和理论依据。