力学强度是决定组织工程心脏瓣膜性能的重要因素。本研究拟采用聚羟基丁酸酯(PHB)作为药物载体,对具有多重生物效应的转化生长因子TGF-β1进行控释处理;对脱细胞天然支架接枝固定RGD肽,然后将PHB-转化生长因子TGF-β1微包载体作用于RGD肽-脱细胞天然支架材料,特异性促进细胞黏附生长,调控细胞外基质(ECM)合成,增强赖氨酰氧化酶(LOX)活性及胶原分子交联,改进组织工程心脏瓣膜力学强度,为临床应用奠定基础。
本研究起点基本同国外同步,立足于组织工程心脏瓣膜(TEHV)构建,尤其对细胞外基质和力学性能的探讨。携带生物信号的脱细胞瓣天然支架被认为是目前TEHV领域最有前景的生物源性支架材料,本研究比较了几种脱细胞方法,认为采用酶+去污剂法制备脱细胞瓣天然支架效果良好。本研究在国内外首次探讨RGD肽结构表征及其对脱细胞瓣的表面修饰,进一步改善该支架的细胞黏附性。同时采用壳聚糖作载体,对具有多重生物效应的转化生长因子TGF-β1控释处理,并应用基因转染技术培养转TGF-β1基因肌成纤维细胞。将转基因种子细胞种植于固定有RGD肽的脱细胞瓣,以构建TEHV亦为国内外首次,不仅特异性促进细胞黏附、生长,而且增强细胞外基质合成及胶原分子交联,改进TEHV力学强度。本研究应用Amplex red荧光法测定瓣膜赖氨酰氧化酶活性为国内外首次报道。这些研究都为TEHV构建和临床应用奠定了良好基础。