中文摘要：

AngRem104是本研究所在血管紧张素II (AngII) 刺激的人肾小球系膜细胞增生硬化过程中克隆的新基因。前期研究发现AngRem104为AngII下游特异的靶基因之一，该基因可调控AngII诱导的纤粘连蛋白（FN）的表达。本研究拟从3个方面进一步探讨AngRem104的基因功能①明确AngRem104对FN的转录调控位点，探讨该基因对FN调控的作用机理，为新药开发及基因治疗奠定基础；②制备AngRem104的抗体，利用酵母双杂交技术筛选与AngRem104相互作用的蛋白，在蛋白水平上揭示AngRem104的生物学功能；利用实验动物模型及人系膜增生性肾小球肾炎肾穿刺标本，在mRNA及蛋白水平观察AngRem104在疾病状态下的表达和分布，探讨该基因在系膜增生性肾小球肾炎及其慢性进展中的作用；③克隆小鼠AngRem104同源基因，为制备该基因的knock-out及转基因小鼠奠定基础。

结论摘要：

AngRem104是AngII刺激的人肾小球系膜细胞增生硬化过程中克隆的新基因。前期研究发现AngII可刺激AngRem104表达上调，而AngRem104可调控AngII诱导的FN表达。本研究首先应用荧光素酶报告基因明确了AngRem104对FN的转录调控位点位于其上游调控序列-122到-507间，是正反应调控区；其次，利用酵母双杂交筛选出7个与AngRem104相互作用的蛋白糖皮质激素受体AF-1特异延伸因子、β2-微球蛋白、巴戴-比德尔综合征2及4个与细胞代谢有关的蛋白。免疫共沉淀发现新基因AngRem104和GR-EF蛋白在哺乳动物细胞中存在直接相互作用。流式细胞术和免疫细胞化学证实AngRem104能够影响系膜细胞GR表达。因此本研究在既往研究的基础上，进一步证实了AngRem104是肾小球增生硬化过程中的关键基因。AngRem104可能通过直接调控FN的上游启动序列调节FN的表达，或者通过与GR-EF作用影响GR表达，进而影响NF-κB活性，通过NF-κB活性改变调控FN表达。本研究为揭示AngRem104的基因功能及进一步探讨肾小球硬化纤维化的机制研究开阔了新的视野。